宠物皮肤病之实验室检查法

　　一、细针抽吸（fine－needle aspiration， FNA）

　　细针抽吸主要运用在怀疑有肿瘤疾病的小动物身上。尤其是对多发的肿块和淋巴性疾病。细针抽吸的主要过程：用长度合适的细针（23至25号针头）抽取肿块内的单一细胞悬液。针头可与10或者是20毫升的注射器相连，注射器要求干燥无菌。通过细针抽吸可采取通过FNA可采集多部位的组织样本，包括皮肤和皮下组织、深部或浅表淋巴结、脾、肝、肾、肺、甲状腺、前列腺以及腹腔内来源不明的肿块（如纵隔肿块）。如果抽取浅表部位，抽取部位无需消毒，如果抽取内部的器官，抽取部位需要经过剪毛消毒。

细针抽吸图示

　　将带针头的注射器刺入肿物内，连续抽吸3－4次，恢复到原位。拔出注射器，一般情况下，注射器内看不见所采的组织样品，仅针头内的就可以满足需要，可以涂抹3－4张质量优良的片子。将采取的组织制作好以后，进行染色，一般为diff－quick染色。细针抽吸可以诊断个别的肿瘤性疾病如肥大细胞瘤。但不能了解肿块的病理特点，如乳腺肿瘤，不能用细针抽吸的方法代替病理学检查。

　　A液作用为固定载玻片上面的样品，B液为红色染嗜酸性细胞，C液为蓝色，使嗜碱性细胞着色。A液染色时间为10－20秒，B液为5－10秒，C液也为5－10秒。染色时间根据染色效果可以适当增加或者是减少。染色后将瓶盖旋紧，防止挥发。该染色可运用于血涂片、细胞学涂片，粪便和尿液沉淀图片。

　　二、皮肤组织活检

　　皮肤病变诊断的具有说服意义的方法。分为打孔组织活检和切除活检。组织活检应结合病史，动物种类，临床症状，活检取出样品的位置，用药史等信息结合起来才具有重要意义。

　　1.打孔活检

图一打孔活检示意图

图二为组织活检打孔器

　　组织活检打孔器分为3mm，4mm和6mm，8mm。3mm和4mm孔径用于鼻镜和脚垫的活检。6mm和8mm孔径可用于皮肤和其他组织的活检。

　　组织活检具体过程：将活检针放置到活检部位上，在按压作用力下顺时针旋转活检针切入皮肤。切头全层皮肤后用镊子轻轻夹住活检皮肤组织，提起后使用手术刀或者是手术剪剪短皮下组织。迅速将切下的皮肤组织样本放入福尔马林保存液中，采样后皮肤为一椭圆型空洞，可以让其自己愈合或者缝合一针。在皮肤病变和正常部位交界处采取样品。如果病变大面积，需要在多个部位采取样品。如果是在动物敏感部位采样，可进行全身镇静或者局部麻醉。

　　2.切除活检

　　就是肿物切除后采取组织进行病理检查。

　　三、微生物的培养

　　真菌的培养

　　DTM／ESA廯菌培养基

该培养基分为两部分，为不同的培养基。

　　DTM廯菌快速培养基。颜色较浅，偏橙色。透明，其中含有抗生素成分，可最大程度的抑制霉菌和污染菌的生长。廯菌生长后培养基变红。ESA促分生孢子培养基，颜色较深，偏土黄色，不透明。可最大限度抑制霉菌和污染菌的细菌生长，并可更容易让廯菌产生大分生孢子用于鉴别。廯菌生长后培养基变为蓝绿色。可能会出现假阳性的结果。出现阳性结果后，需要注意廯菌菌落的生长类型，判断可能的感染来源。结合染色（可只使用diff－quick染液的c液）在显微镜下观察判断大分生孢子类型。

显微镜下的大小孢子菌